Pobrany materiał był cyklicznie badany zgodnie z poniższym schematem.

 

I. Analizy molekularne

Prace prowadzono na próbach pobranych zaraz do dostarczeniu materiałów. Etapy badań obejmowały:

1. Izolację DNA za pomocą dedykowanych zestawów

a) próby wirowano stosując wirówkę Eppendorf centrifuge 5420

b) czystość wyizolowanego DNA sprawdzano spektrofotometrycznie (BioSpectrometer, Eppendorf)

c) DNA amplifikowano w reakcji PCR stosując termocykler Labcycler firmy SensQuest

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

d) wynik reakcji PCR sprawdzano spektrofotometrycznie za pomocą zestawu firmy BioRad

 

II. Badanie aktywności mikrobiologicznej gleb

1. Aktywność dehydrogenazowa (AD)

a) wykonano odpowiednie ekstrakty ze świeżego materiału glebowego

b) oznaczenie AD wykonano metodą spektrofotometryczną (Shimadzu UV-1600)

2. Oznaczenie aktywności respiracyjnej (AR) techniką chromatografii gazowej (Varian CP-380)

 

III. Analizy fizyko-chemiczne - próby świeże

1. Wyznaczanie odczynu pH, potencjału oksydoredukcyjnego Eh oraz przewodnictwa elektrolitycznego EC w świeżym materiale glebowym - wielofunkcyjny miernik Hach SensION+ MM150

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Oznaczenie wilgotności

Materiał został rozdrobniony i przesiany przez sito (2mm)

A następnie wysuszony w temperaturze 105°C w suszarce firmy Termaks

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Oznaczenie biogennych form azotu (N-NO2, N-NO3, N-NH4) i fosforu (P Olsena, P-PO4) w świeżym materiale glebowym

a) przygotowanie ekstraktów

b) oznaczenie metodą kolorymetryczną (Autoanalyzer III, Seal)

 

IV. Analizy fizyko-chemiczne - próby suche

1. Suszenie materiału w warunkach laboratoryjnych do uzyskania stałej masy (gleba powietrznie sucha)

2. Pomiar zawartości ogólnego węgla organicznego (TOC) i nieorganicznego (IC)

a) przygotowanie prób

b) analiza metodą podczerwieni (analizator TOC-V_CSH Shimadzu)

3. Mineralizacja prób glebowych z wykorzystaniem mineralizatora Ethos One firmy Milestone

4. Oznaczenie zawartości Ca, Mg i K w zmineralizowanych próbach metodą FAAS (Hitachi ZA3300)

5. Wyznaczanie pełnej pojemności wodnej (PPW) gleb metodą wagową

6. Oznaczenie zawartości węgla łatwodegradowalnego (EDC) metodą spektrofotometryczną

Pomiar wykonano przy użyciu spektrofotometru BioSpectrometer (Eppendorf)

7. Oznaczenie suma zasadowych kationów wymiennych (CEC) metodą miareczkowania

8. Oznaczanie zawartości kwasów humusowych metodą spektrofotometryczną